尖孢镰刀菌会引起黄瓜枯萎病的发生。研究人员拟从土壤中分离筛选出对黄瓜枯萎病有抑制效果的拮抗细菌（jb9菌株），以期为黄瓜枯萎病提供生物防治。实验过程如图1所示，回答下列问题：
（1）将土壤样品制成悬浮液，步骤I使用的接种方法是 平板划线法平板划线法，纯化培养的关键是 无菌操作无菌操作。培养基a必备的营养物质有 碳源、氮源、水和无机盐碳源、氮源、水和无机盐。
（2）为验证jb9菌株的抑菌效果，需要先将尖孢镰刀菌均匀地接种在培养基b表面，则接种方法是 稀释涂布平板法稀释涂布平板法。滤纸组作为对照组，用 无菌水无菌水处理滤纸。
（3）jb9菌株能合成分泌真菌细胞壁降解酶（HCD），抑制尖孢镰刀菌（真菌）的生长。科研人员将获取的HCD基因导入黄瓜细胞，培育抗枯萎病的转基因植株。含HCD基因的DNA片段、质粒的结构及限制酶切割位点如图2所示。
①根据题意，将HCD基因与图示的质粒重组，应选用的限制酶是 BamHI和HindⅢBamHI和HindⅢ。在筛选培养基上，要加入 氨苄青霉素氨苄青霉素来筛选含有HCD基因的受体细胞。将受体细胞培育后获得转基因植株。
②为确定转HCD基因植株能抗枯萎病，在个体水平上的检测方法是 用尖孢镰刀菌感染转HCD基因的植株，观察其抗病情况用尖孢镰刀菌感染转HCD基因的植株，观察其抗病情况。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】平板划线法；无菌操作；碳源、氮源、水和无机盐；稀释涂布平板法；无菌水；BamHI和HindⅢ；氨苄青霉素；用尖孢镰刀菌感染转HCD基因的植株，观察其抗病情况
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/5 8:0:9组卷：3引用：3难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
