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2023年我国转基因大豆的产业化试点已进一步扩大。大豆培育时需要将抗除草剂(草甘膦)基因CP4-EPSPS和质粒构建基因表达载体,利用农杆菌转化到大豆细胞中,获得具有抗除草剂(草甘膦)性状的转基因大豆。回答下列问题:
(1)常用PCR特异性地快速扩增CP4-EPSPS基因的原理是
DNA复制
DNA复制
;PCR反应体系中需要添加的DNA聚合酶具有
耐高温
耐高温
的特点,需提供与两条模板链结合的
2
2
种引物,引物在DNA复制中的作用是
使Taq酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸形成子链
使Taq酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸形成子链

(2)构建抗除草剂基因的表达载体时,首先用
限制酶
限制酶
切割质粒和含有CP4-EPSPS基因的DNA片段,再利用
DNA连接酶
DNA连接酶
酶将CP4-EPSPS基因拼接到质粒的切口处形成一个重组DNA分子。
(3)采用农杆菌转化的原因是农杆菌细胞中含有Ti质粒,当它侵染大豆细胞后,能将Ti质粒上的
T-DNA
T-DNA
转移到被侵染的细胞中,并且将其整合到该细胞的
染色体DNA
染色体DNA
上,获得转基因大豆。最后还需要进行个体生物学水平鉴定,通过
喷施除草剂/喷施草甘膦
喷施除草剂/喷施草甘膦
以确定抗除草剂大豆的培育是否获得成功。

【答案】DNA复制;耐高温;2;使Taq酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸形成子链;限制酶;DNA连接酶;T-DNA;染色体DNA;喷施除草剂/喷施草甘膦
【解答】
【点评】
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发布:2024/7/17 8:0:9组卷:3引用:2难度:0.6
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括
     
     

    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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