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新冠肺炎的病原体是一种新型冠状病毒,其遗传物质极易降解,患者会出现发热、呕吐、呼吸困难等一系列消化和呼吸系统症状。为快速确定治疗方案,需对疑似患者进行病毒核酸检测,常用方法之一为RT-PCR荧光探针法,过程如图所示,请回答下列问题:

(1)为得到检测所需的大量病毒核酸基因,科研人员利用PCR技术进行扩增。如果PCR反应得不到相应的扩增产物,可判断待测样品中不含病毒核酸片段,PCR技术还可用于基因工程中的哪一步?
获取目的基因
获取目的基因

(2)用RT-PCR荧光探针法检测病毒核酸时,样本核酸通过过程①
逆转录
逆转录
得到cDNA,过程②中用到的酶是
耐高温的DNA聚合酶/TaqDNA聚合酶
耐高温的DNA聚合酶/TaqDNA聚合酶
,此外反应体系中还应加入
一段带有荧光物质和淬灭物质的特异性单链核苷酸序列
一段带有荧光物质和淬灭物质的特异性单链核苷酸序列
作为探针。
(3)已知当探针完整时,淬灭物质抵消了荧光物质的荧光发射,检测不到荧光信号,请尝试解释荧光探针法检测新型冠状病毒的原理
探针为一段带有荧光物质和淬灭物质的特异性单链核苷酸序列,在探针完整的情况下,荧光物质发射的荧光信号被淬灭物质吸收,反应体系中检测不到荧光强度。如PCR反应体系中存在目的基因(即病毒核酸序列),该探针与模板链结合,TaqDNA聚合酶催化子链延伸时能够该荧光探针降解,荧光物质与淬灭物质分离,游离的荧光物质发出荧光。因此可以通过检测反应体系中的荧光强度,来判断PCR产物(新冠病毒核酸)扩增量。
探针为一段带有荧光物质和淬灭物质的特异性单链核苷酸序列,在探针完整的情况下,荧光物质发射的荧光信号被淬灭物质吸收,反应体系中检测不到荧光强度。如PCR反应体系中存在目的基因(即病毒核酸序列),该探针与模板链结合,TaqDNA聚合酶催化子链延伸时能够该荧光探针降解,荧光物质与淬灭物质分离,游离的荧光物质发出荧光。因此可以通过检测反应体系中的荧光强度,来判断PCR产物(新冠病毒核酸)扩增量。

【答案】获取目的基因;逆转录;耐高温的DNA聚合酶/TaqDNA聚合酶;一段带有荧光物质和淬灭物质的特异性单链核苷酸序列;探针为一段带有荧光物质和淬灭物质的特异性单链核苷酸序列,在探针完整的情况下,荧光物质发射的荧光信号被淬灭物质吸收,反应体系中检测不到荧光强度。如PCR反应体系中存在目的基因(即病毒核酸序列),该探针与模板链结合,TaqDNA聚合酶催化子链延伸时能够该荧光探针降解,荧光物质与淬灭物质分离,游离的荧光物质发出荧光。因此可以通过检测反应体系中的荧光强度,来判断PCR产物(新冠病毒核酸)扩增量。
【解答】
【点评】
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发布:2024/5/23 8:0:8组卷:7引用:2难度:0.7
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  • 1.数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术,其原理如图所示。下列有关叙述正确的是(  )

    发布:2024/12/30 23:30:2组卷:7引用:2难度:0.6
  • 2.科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力,利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因,从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题:
    (1)PCR定点突变技术属于
     
    (填“基因工程”或“蛋白质工程”)。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体,常用
     
    将基因表达载体导入植物细胞,还需用到植物细胞工程中的
     
    技术,才能最终获得转基因植物。
    (2)PCR过程所依据的原理是
     
    。利用PCR技术扩增,若将一个目的基因复制10次,则需要在缓冲液中至少加入
     
    个引物。
    (3)目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为
     
    。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大,可能的原因是
     

    (4)另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中,经培育获得一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是
     

    A.选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
    B.采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
    C.人的生长激素基因能在小鼠细胞表达,说明遗传密码在不同种生物中可以通用
    D.将转基因小鼠体细胞进行核移植(克隆),可以获得多个具有外源基因的后代

    发布:2025/1/16 8:0:1组卷:14引用:2难度:0.6
  • 3.下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是(  )

    发布:2024/12/30 23:30:2组卷:4引用:3难度:0.7
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