2017年CAR-T疗法获批可用于癌症治疗。其核心是将具有肿瘤识别功能的CAR基因整合到人体T淋巴细胞，形成能准确定位并杀死癌细胞的CAR-T细胞，请回答下列问题：
（1）已知CAR基因的全部序列，科研人员通过 人工合成人工合成法和PCR技术可获得大量该基因片段。在PCR反应体系中除模板外还需加入 引物、热稳定DNA聚合酶和4种脱氧核糖核苷酸引物、热稳定DNA聚合酶和4种脱氧核糖核苷酸。
（2）治疗基本过程是：分离患者T细胞并构建CAR-慢病毒运载体→体外基因转移形成CAR-T细胞→筛选、培养CAR-T细胞→输入患者体内，该疗法属于 体外基因体外基因治疗，该运载体进入人体细胞的方式通常是 胞吞胞吞。该方法采用的是自身T细胞，而不用异体T细胞，其原因是 避免发生排斥反应避免发生排斥反应。
（3）为检查CAR基因能否在T细胞中翻译成蛋白质，可采用 抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交法检测，CAR-T细胞培养所需CO2的主要作用是 维持pH的稳定维持pH的稳定，传代培养时，贴满瓶壁的细胞需要用 胰蛋白酶或胶原蛋白酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理后再进行分瓶培养。
【答案】人工合成；引物、热稳定DNA聚合酶和4种脱氧核糖核苷酸；体外基因；胞吞；避免发生排斥反应；抗原-抗体杂交；维持pH的稳定；胰蛋白酶或胶原蛋白酶
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/25 8:0:9组卷：5引用：1难度：0.7
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1．动物细胞培养和植物组织培养是细胞工程的基本技术，下列关于这两项技术的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 1:30:1组卷：29引用：2难度：0.7 -
2．回答与基因工程、动物克隆和胚胎工程有关的问题：
（1）几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。在进行基因工程操作时，可以从植物体中提取几丁质酶的mRNA，以mRNA为材料可以获得cDNA，其原理是。若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。
（2）为了提高动物成纤维细胞克隆形成率，可以选择适宜的培养基、添加牛血清、以支持生长等措施。当第一个卡氏瓶中的细胞浓度不再增加时，若要细胞继续增殖，可采用的方法是。细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO2浓度，CO2的作用是。
（3）下列关于胚胎工程的叙述，错误的是
A．在动物的饲料中添加一定量的促性腺激素促使超数排卵
B．若在囊胚期进行胚胎分割，内细胞团均等分割，滋养成则不必
C．可以从雌性动物体内卵泡处吸取卵泡液，取出卵母细胞进一步培养成熟
D．胚胎成纤维细胞可以用于胚胎干细胞的培养，因为其能分泌抑制细胞分化的物质。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：4引用：1难度：0.7 -
3．据国际糖尿病联盟最新数据，2021年全球约5.37亿成人患有糖尿病，670万成人因糖尿病或其并发症死亡。如图是研究人员提出的治疗方案，请回答下列问题：
（1）从患者体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为。一般来说，动物细胞培养需要的条件有（少答出两点）。
（2）利用PCR技术扩增正常胰岛素基因的前提条件是。目前临床用的胰岛素生效较慢，科学家将胰岛素β链的第28和29个氨基酸调换顺序，成功获得了速效胰岛素。生产速效胰岛素，需要对进行定向改造。
A.胰岛素
B.胰岛素mRNA
C.胰岛素基因
D.胰岛
（3）欲检测胰岛类似细胞是否具有胰岛B细胞的正常生理功能，可设计如下实验：将等量的胰岛类似细胞与正常胰岛B细胞分别加入两组相等浓度的培养液中，适宜且相同条件下进行培养，一段时间后分别检测两组培养液中。
（4）该治疗糖尿病的方法与异体移植相比，突出的优点是。发布：2024/12/31 2:30:2组卷：35引用：2难度：0.6
