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正常机体中,氨基转移酶主要存在于细胞内,在血清中活性很低。不同组织中同一种酶的活性不同,肝组织中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的活性最高。临床上通过检测血清中ALT的活性,作为诊断肝功能是否正常的依据。检测原理为:
L-丙氨酸+物质A
ALT
37
水浴
丙酮酸
丙酮酸+物质B
37
水浴
物质C
物质C在强碱溶液中呈红棕色,颜色深浅与丙酮酸生成量的多少即ALT活性的高低成正比。检测过程如表所示:
操作步骤 加入物(mL) 对照管 检测管
血清 0.1 0.1
基质缓冲液(含丙氨酸和物质A,pH7.4) - 0.5
混匀,37℃水浴30min
用盐酸配制的物质B溶液 0.5 0.5
基质缓冲液(含丙氨酸和物质A,pH7.4) 0.5 -
混匀,37℃水浴20min
0.4mol/LNaOH溶液 5.0 5.0
混匀后,测定检测管和对照管的吸光度,并根据两者的差值,再参照已有标准曲线,可得到ALT活性。回答下列问题。
(1)操作③水浴时,若将温度由37℃调为85℃,则血清中ALT活性将
失活
失活
(填“升高”“降低”或“失活”),其主要原因是
温度过高,酶的空间结构遭到破坏,使酶失活
温度过高,酶的空间结构遭到破坏,使酶失活

(2)操作②中,基质缓冲液的作用是
为酶促反应提供底物,维持溶液pH稳定
为酶促反应提供底物,维持溶液pH稳定

(3)操作①中,若用生理盐水代替对照管中的血清,会导致检测结果偏高,主要理由
因为血清中有少量的丙氨酸和物质A,在ALT的催化下,可生成少量丙酮酸,若用生理盐水代替,对照管中就缺少这部分丙酮酸,导致检测结果偏高。
因为血清中有少量的丙氨酸和物质A,在ALT的催化下,可生成少量丙酮酸,若用生理盐水代替,对照管中就缺少这部分丙酮酸,导致检测结果偏高。

(4)某人化验报告单显示其血清的ALT活性为90卡门氏单位,明显超过正常参考值,表明此人肝功能异常。分析ALT活性升高的原因
正常情况下,ALT主要存在于肝细胞中,由于某些原因导致肝细胞破裂或膜通透性增大,ALT大量释放入血液,使血清中ALT活性明显升高。
正常情况下,ALT主要存在于肝细胞中,由于某些原因导致肝细胞破裂或膜通透性增大,ALT大量释放入血液,使血清中ALT活性明显升高。

【考点】酶的特性及应用
【答案】失活;温度过高,酶的空间结构遭到破坏,使酶失活;为酶促反应提供底物,维持溶液pH稳定;因为血清中有少量的丙氨酸和物质A,在ALT的催化下,可生成少量丙酮酸,若用生理盐水代替,对照管中就缺少这部分丙酮酸,导致检测结果偏高。;正常情况下,ALT主要存在于肝细胞中,由于某些原因导致肝细胞破裂或膜通透性增大,ALT大量释放入血液,使血清中ALT活性明显升高。
【解答】
【点评】
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发布:2024/9/27 12:0:2组卷:13引用:3难度:0.5
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