高粱是我国重要的粮食作物，但其赖氨酸含量较低。天冬氨酸激酶（AK）和二氢吡啶羧酸合酶（DHPS）是赖氨酸合成途径中两种重要的酶，并协同控制植物中游离赖氨酸的合成速率。科学家把来源于细菌的外源AK和DHPS基因与胚乳特异性启动子导入高粱，获得游离赖氨酸含量显著增加的高粱植株。请回答相关问题。
（1）构建基因表达载体过程中，选用两种限制酶同时处理目的基因和质粒，其优点是 目的基因和质粒的正向连接，避免发生质粒和目的基因的自连和反向连接目的基因和质粒的正向连接，避免发生质粒和目的基因的自连和反向连接，构建基因表达载体还需要的工具酶是 DNA连接酶DNA连接酶。AK基因和DHPS基因上游的胚乳特异性启动子是 RNA聚合酶RNA聚合酶识别结合的位点，驱动基因转录。
（2）将目的基因导入高粱细胞最常用的方法是 花粉管通道法花粉管通道法，目的基因进入受体细胞后需要 植物组织培养植物组织培养利用技术才能获得转基因植株。
（3）目的基因的检测与鉴定，用PCR技术检测转基因植株中目的基因是否成功转录出mRNA，首先从转基因高粱植株的 胚乳细胞胚乳细胞中提取mRNA，然后通过 逆转录逆转录得到cDNA，然后进行PCR扩增，图1是对扩增产物电泳的结果，植株 4、5、74、5、7（填数字）中AK基因和DHPS基因都转录成功。
（4）图2为野生高粱细胞内赖氨酸合成与分解代谢的部分过程。细菌基因编码的AK和DPHS对赖氨酸浓度不敏感，据此分析转基因植株赖氨酸含量较高的原因 基因编码的AK和DPHS对赖氨酸浓度不敏感，因而赖氨酸合成过程不会因为赖氨酸含量上升而被抑制基因编码的AK和DPHS对赖氨酸浓度不敏感，因而赖氨酸合成过程不会因为赖氨酸含量上升而被抑制。LKR和SDH是赖氨酸分解代谢的关键酶，据此再提出一点利用基因工程思路提高高粱赖氨酸含量的方法是 设法改造或敲除控制LKR合成的相关基因，从而减少赖氨酸的分解过程，进而提高赖氨酸的含量设法改造或敲除控制LKR合成的相关基因，从而减少赖氨酸的分解过程，进而提高赖氨酸的含量。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】目的基因和质粒的正向连接，避免发生质粒和目的基因的自连和反向连接；DNA连接酶；RNA聚合酶；花粉管通道法；植物组织培养；胚乳细胞；逆转录；4、5、7；基因编码的AK和DPHS对赖氨酸浓度不敏感，因而赖氨酸合成过程不会因为赖氨酸含量上升而被抑制；设法改造或敲除控制LKR合成的相关基因，从而减少赖氨酸的分解过程，进而提高赖氨酸的含量
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/27 8:0:9组卷：5引用：1难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
