重组人胰岛素是世界上第一个基因工程药物，它的使用造福了亿万糖尿病患者。兴趣小组探究工程菌的构建，实验所用质粒载体如图所示，其中LacZ基因的表达产物能将无色反应物X-gal水解，从而使菌落呈蓝色，否则菌落呈现白色；Ampr基因的表达产物分泌到细胞外发挥作用。本实验所用的受体大肠杆菌无LacZ基因。
（1）将表达载体转入大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：一般先用Ca2+处理细胞，使细胞处于 一种能吸收周围环境中DNA分子一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。
（2）双重筛选培养基：培养基中加入 氨苄青霉素氨苄青霉素用以筛选出导入了质粒载体的受体菌（转化子），培养基中加入 X-galX-gal用以鉴别出含重组质粒的受体菌（重组子）。重组子的菌落颜色是 白色白色，原因是 重组子因LacZ基因被破坏，无法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色重组子因LacZ基因被破坏，无法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色。
（3）长时间培养后，培养基中转化子形成的菌落周围出现了一些非转化子形成的较小菌落，这些非转化子菌落形成的原因是 培养时间过长，Ampr基因（抗性基因）的表达产物分泌积累，使周围培养基氨苄青霉素失效培养时间过长，Ampr基因（抗性基因）的表达产物分泌积累，使周围培养基氨苄青霉素失效。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】一种能吸收周围环境中DNA分子；氨苄青霉素；X-gal；白色；重组子因LacZ基因被破坏，无法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色；培养时间过长，Ampr基因（抗性基因）的表达产物分泌积累，使周围培养基氨苄青霉素失效
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/28 8:0:9组卷：0引用：2难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
