三氯生是一种抑苗物质，可以替代抗生素用于基因工程中筛选含目的基因的受体细胞。2021年某科研团队通过先筛选出一种对三氯生抵抗性较强的重组质粒，再将可以受温度调控的基因插入该质粒上，构建了温度调控表达质粒。
（1）图1中，步骤Ⅰ需要的工具酶是 限制酶和DNA连接酶限制酶和DNA连接酶；步骤Ⅱ常用的方法是用 Ca2+Ca2+处理使细菌成为感受态细胞；为达到步骤Ⅰ预期的筛选目的，所用物质X最可能为 三氯生三氯生。
（2）已知fabV基因（-A和-B代表从不同苗中获得）可以使大肠杆菌抵抗三氯生。在图中，fabV-A基因和fabV-B基因是 目的目的（目的/标记）基因。
（3）利用从细菌中提取的DNA通过PCR技术获取fabV-A基因时，需要的特定酶是 Taq酶Taq酶。该酶只能从引物的 3'3'端延伸DNA链，而不能从头开始合成DNA，因此需要先根据 目的基因fabV-B基因两端序列目的基因fabV-B基因两端序列设计两种特异性引物序列。
（4）为获得一种增强大肠杆菌对三氯生的抵抗作用效果较好的重组质粒，将含有不同质粒的大肠杆菌分别接种到相应培养基中。培养一段时间后，结果如图2，则适宜选作构建温度调控表达质粒的是 （重组质粒）pEA（重组质粒）pEA。
（5）科学家对上述选出质粒进行改造，获得了图3所示质粒。其中P1和P2是启动子，可以启动转录；C基因在低温下会抑制P1；R基因在高温下会抑制P2；T1和T2是终止子，可以终止转录。如果将lacZ基因和GFP基因插入图质粒中，使得最后表现为高温下只表达GFP蛋白，而低温下只表达lacZ蛋白。则以下说法正确的有 ADAD。
A.GFP基因插在R基因和终止子T1之间
B.lacZ基因插在R基因和终止子T1之间
C.GFP基因插在启动子P2和终止子T2之间
D.lacZ基因插在启动子P2和终止子T2之间
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】限制酶和DNA连接酶；Ca2+；三氯生；目的；Taq酶；3'；目的基因fabV-B基因两端序列；（重组质粒）pEA；AD
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/8/5 8:0:8组卷：6引用：1难度：0.5
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
