已知人类的某种遗传病受基因a控制，基因纯合时细胞内缺乏相应基因控制合成的蛋白质而表现症状，为探究基因a不能表达是否与其启动子有关，将基因a的启动子片段转移到如图所示的载体上，即插入荧光蛋白基因启动子的位置，然后将其导入小鼠细胞内，根据能否调控荧光蛋白基因的表达，进行实验研究。已知荧光蛋白基因表达后，在紫外线照射下动物会发生荧光反应。回答下列相关问题：
（1）为将基因a的启动子片段连接到图示载体上，科研人员选择HindⅢ和EcoRⅠ两种限制酶对基因a启动子片段和载体进行切割，目的是 防止载体和启动子片段自身环化、实现（基因a）启动子片段的定向连接防止载体和启动子片段自身环化、实现（基因a）启动子片段的定向连接（答出两点）。在基因表达载体的构建过程中还需要 DNA连接DNA连接酶的参与，该酶的作用是 将载体和启动子片段连接起来将载体和启动子片段连接起来。
（2）构建基因表达载体后利用 显微注射显微注射的方法将其导入小鼠的 受精卵受精卵中，将该细胞培养成早期胚胎的过程中，需将培养皿置于含 95%的空气和5%CO295%的空气和5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
（3）为了获得多个具有同种遗传物质的小鼠，可对早期胚胎采取的具体操作是 选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行均等分割选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行均等分割，通过检测 转基因小鼠在紫外线照射下是否发生荧光反应转基因小鼠在紫外线照射下是否发生荧光反应来确定基因a不能表达与启动子是否有关。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】防止载体和启动子片段自身环化、实现（基因a）启动子片段的定向连接；DNA连接；将载体和启动子片段连接起来；显微注射；受精卵；95%的空气和5%CO2；选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行均等分割；转基因小鼠在紫外线照射下是否发生荧光反应
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/19 8:0:9组卷：2引用：2难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
