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铁皮石斛作为一种集观赏和药用价值于一身的重要中药材,在人们长期掠夺式采挖与生存条件的破坏下,野生资源濒临灭绝,药材价格不断攀升。现利用农杆菌介导的铁皮石斛遗传转化方法,不仅能上调植物有益成分表达水平,还能增强其抗逆性和抗病虫能力,同时还能控制其生长发育进程,以利市场需求。请回答下列问题:
(1)农杆菌的活化培养:挑取农杆菌于
液体
液体
(填“液体”或“固体”)培养基中活化并扩大培养,培养基中含有0.5%氯化钠,其作用是
调节渗透压(调节渗透压和提供无机盐营养)
调节渗透压(调节渗透压和提供无机盐营养)

(2)侵染石斛原球茎:挑选生长状态良好、颜色呈嫩绿色、质地均匀且较为松散的原球茎置于36-45khz条件下超声波处理1-3min,把原球茎切割为3-5mm方块,再对其进行
消毒
消毒
处理后浸入农杆菌侵染液。该过程中超声波和对原球茎进行切割处理的目的是
消毒超声波和切割处理造成球茎微损伤,有利于提高农杆菌的感染效率
消毒超声波和切割处理造成球茎微损伤,有利于提高农杆菌的感染效率

(3)共培养和筛选:侵染结束后,用滤纸吸干原球茎上多余侵染液,然后迅速将原球茎转移至共培养基培养;培养基中的蔗糖的作用是
提供碳源(提供碳源和维持渗透压)
提供碳源(提供碳源和维持渗透压)
。将共培养后的原球茎用
无菌水
无菌水
冲洗4-5次,再用浓度为480-520mg/L的头孢溶液清洗1-2min,将原球茎用滤纸吸干水分,迅速置于筛选培养基中培养。该过程中使用头孢类抗生素的作用是
无菌水杀灭农杆菌及其他杂菌
无菌水杀灭农杆菌及其他杂菌

(4)植株再生:将筛选得到的原球茎接种于筛选培养基中培养,待分化出芽后转入
生根培养基
生根培养基
中培养至组培苗,后要进行炼苗操作,炼苗目的是
提高试管苗对外部环境的适应能力
提高试管苗对外部环境的适应能力

(5)实验过程中用不同种类、浓度的激素对铁皮石斛原球茎形成愈伤组织和不定芽进行了研究,具体的实验结果如下表所示:
培养基号 培养基(MS) 6-BA(mg/L) 2,4-D(mg/L) 蔗糖(g/L) 接种数(个) 原球茎死亡数(个) 诱导愈伤组织数(个) 每块愈伤不定芽数(个)
1 12 0.5 1.2 30 30 5 25 3
2 12 1.0 1.5 20 30 4 26 3
3 12 1.25 0.8 25 30 3 27 11
4 32 0.5 1.5 25 30 6 24 3
5 32 1.0 0.8 30 30 4 26 7
6 32 1.25 1.2 20 30 3 27 5
请分析若要进行大规模的培养铁皮石斛,最好选择
3
3
号培养基,判断的依据是
接种相同数量的原球茎,原球茎死亡数低,诱导愈伤组织数和每块愈伤不定芽数高
接种相同数量的原球茎,原球茎死亡数低,诱导愈伤组织数和每块愈伤不定芽数高

【答案】液体;调节渗透压(调节渗透压和提供无机盐营养);消毒;消毒超声波和切割处理造成球茎微损伤,有利于提高农杆菌的感染效率;提供碳源(提供碳源和维持渗透压);无菌水;无菌水杀灭农杆菌及其他杂菌;生根培养基;提高试管苗对外部环境的适应能力;3;接种相同数量的原球茎,原球茎死亡数低,诱导愈伤组织数和每块愈伤不定芽数高
【解答】
【点评】
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发布:2024/7/25 8:0:9组卷:38引用:1难度:0.5
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    发布:2024/12/31 3:30:1组卷:41引用:12难度:0.5
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