某动物体内含有某目的基因，研究者欲将该基因导入大肠杆菌的质粒中保存，该质粒含有氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、LacZ基因及一些酶切位点，其结构和简单的操作步骤如图所示。回答下列问题：

（1）保存基因技术的成熟使构建某种生物的基因文库成为可能，重组DNA技术是保存生物基因的关键技术。据图总结在受体菌中保存基因的基本步骤：

目的基因的筛选与获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定→保存含目的基因的细胞（或细菌）

目的基因的筛选与获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定→保存含目的基因的细胞（或细菌）

（用→将各步骤连接）。
（2）在第③步中，为了使质粒DNA能与目的基因连接，需要在混合物中加入

DNA连接

DNA连接

酶。若第②步用同一种限制酶处理质粒和目的基因，仅考虑1个目的基因和1个质粒，则在第③步的混合物中，会形成

2

2

种含目的基因的重组产物。进行第④步之前一般用Ca₂+对大肠杆菌进行处理，目的是

使大肠杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态

使大肠杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态

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（3）在仅添加了氨苄青霉素的培养基上筛选出的细胞不一定是目的细胞，请说明理由：

导入不含目的基因的质粒的细胞也能在含有氨苄青霉素成分的培养基上存活

导入不含目的基因的质粒的细胞也能在含有氨苄青霉素成分的培养基上存活

。请对筛选目的细胞的操作提出完善意见：

在培养基中加入氨苄青霉素成分的同时加入X-gal物质，培养一段时间后，菌落颜色为白色的即为目的菌落

在培养基中加入氨苄青霉素成分的同时加入X-gal物质，培养一段时间后，菌落颜色为白色的即为目的菌落

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