科学家利用基因工程和细胞核移植技术培育了绿色荧光蛋白转基因克隆猪。基本流程是：从荧光水母中获取目的基因，与有关载体重组，将其导入猪胎儿的成纤维细胞，经培养后再将成纤维细胞核植入去核的卵母细胞中，最后培养出转基因克隆猪。
（1）成纤维细胞贴壁生长分裂到表面相互接触时，就会停止分裂，这种现象叫做细胞的 接触抑制接触抑制。若将成纤维细胞进行传代培养，操作时首先用 胰蛋白酶胰蛋白酶处理成细胞悬液。
（2）作为核移植受体细胞的去核卵母细胞一般处在 MⅡ/减数第二次分裂中/减数分裂Ⅱ中期MⅡ/减数第二次分裂中/减数分裂Ⅱ中期期。目前核移植技术中普遍使用的去核方法是 显微操作去核法显微操作去核法。将供体细胞注入去核的卵母细胞，通过 电融合电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚。常通过 电刺激电刺激（物理方法）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。
（3）培养重组细胞时，将细胞所需的营养物质按其种类，数量严格配制而成的培养基称为 合成合成培养基，但通常在培养基中还需要加入适量的 血清血清等天然成分。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是 维持培养液的pH维持培养液的pH。为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量 抗生素抗生素。
【考点】动物细胞培养的条件与过程；动物细胞核移植技术．
【答案】接触抑制；胰蛋白酶；MⅡ/减数第二次分裂中/减数分裂Ⅱ中期；显微操作去核法；电融合；电刺激；合成；血清；维持培养液的pH；抗生素
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/16 8:0:9组卷：6引用：2难度：0.7
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1．动物细胞培养和植物组织培养是细胞工程的基本技术，下列关于这两项技术的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 1:30:1组卷：29引用：2难度：0.7 -
2．回答与基因工程、动物克隆和胚胎工程有关的问题：
（1）几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。在进行基因工程操作时，可以从植物体中提取几丁质酶的mRNA，以mRNA为材料可以获得cDNA，其原理是。若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。
（2）为了提高动物成纤维细胞克隆形成率，可以选择适宜的培养基、添加牛血清、以支持生长等措施。当第一个卡氏瓶中的细胞浓度不再增加时，若要细胞继续增殖，可采用的方法是。细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO2浓度，CO2的作用是。
（3）下列关于胚胎工程的叙述，错误的是
A．在动物的饲料中添加一定量的促性腺激素促使超数排卵
B．若在囊胚期进行胚胎分割，内细胞团均等分割，滋养成则不必
C．可以从雌性动物体内卵泡处吸取卵泡液，取出卵母细胞进一步培养成熟
D．胚胎成纤维细胞可以用于胚胎干细胞的培养，因为其能分泌抑制细胞分化的物质。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：4引用：1难度：0.7 -
3．据国际糖尿病联盟最新数据，2021年全球约5.37亿成人患有糖尿病，670万成人因糖尿病或其并发症死亡。如图是研究人员提出的治疗方案，请回答下列问题：
（1）从患者体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为。一般来说，动物细胞培养需要的条件有（少答出两点）。
（2）利用PCR技术扩增正常胰岛素基因的前提条件是。目前临床用的胰岛素生效较慢，科学家将胰岛素β链的第28和29个氨基酸调换顺序，成功获得了速效胰岛素。生产速效胰岛素，需要对进行定向改造。
A.胰岛素
B.胰岛素mRNA
C.胰岛素基因
D.胰岛
（3）欲检测胰岛类似细胞是否具有胰岛B细胞的正常生理功能，可设计如下实验：将等量的胰岛类似细胞与正常胰岛B细胞分别加入两组相等浓度的培养液中，适宜且相同条件下进行培养，一段时间后分别检测两组培养液中。
（4）该治疗糖尿病的方法与异体移植相比，突出的优点是。发布：2024/12/31 2:30:2组卷：35引用：2难度：0.6
