人绒毛膜促性腺激素（HCG）是一种糖蛋白激素，由α链和β链（hCGβ）结合而成。近年研究显示，hCGβ可表达于结肠癌等多种恶性肿瘤细胞，研发抗hCGβ疫苗已成为近年来肿瘤生物治疗新的热点，如图1为其主要研究路线，请回答下列问题。
（1）女性在妊娠第8d左右，尽管体内HCG含量很低，但仍可用抗人绒毛膜促性腺激素单抗制成的“早早孕诊断试剂盒”作出诊断，体现出单克隆抗体具有 特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高的优点。某女性未受孕但被检测出血清HCG含量大幅度升高，为明确原因，还需进行 肿瘤肿瘤检测。
（2）登录GenBank数据库，可查询获得hCGβ基因组序列，再通过 PCRPCR可特异性地快速扩增hCGβ基因。用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用 ②③②③两种限制酶（选填编号①EcoRⅠ②NheⅠ③KpnⅠ④BamHⅠ）切割。
（3）酶切后的载体和目的基因片段，通过 DNA连接DNA连接酶作用后形成混合连接物，导入处于 感受态感受态状态的大肠杆菌细胞。为了筛选出转入重组质粒的大肠杆菌，可用酶切法鉴定重组质粒，通过电泳检测酶切片段判断是否构建成功。选用与构建重组质粒相同的酶处理重组质粒，电泳后得到如图2所示结果，据图2可判断 33号样品为构建成功的重组质粒，4号样品最可能为 普通质粒普通质粒。
（4）培养小鼠黑色素瘤细胞过程中，除无菌、无毒的环境外，还要控制适宜的 温度、pH、溶解氧温度、pH、溶解氧（至少答出两点）和渗透压等条件。从细胞结构角度解释，动物细胞培养需要考虑渗透压的原因是 动物细胞没有细胞壁，对培养液的渗透压比较敏感动物细胞没有细胞壁，对培养液的渗透压比较敏感
（5）HCG是胚胎着床和妊娠维持所必须的种激素，若对育龄女性肿瘤患者多次使用抗HCG疫苗，可能引发的副作用是 不易受孕不易受孕。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】特异性强、灵敏度高；肿瘤；PCR；②③；DNA连接；感受态；3；普通质粒；温度、pH、溶解氧；动物细胞没有细胞壁，对培养液的渗透压比较敏感；不易受孕
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/31 8:0:9组卷：11引用：3难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
