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β-胡萝卜素可在人体内转化为维生素A.普通水稻胚乳细胞中不含β-胡萝卜素,科研人员利用基因工程技术培育富含β-胡萝卜素的第一代“黄金大米”。
(1)培育第一代“黄金大米”时,需要将八氢番茄红素合成酶(psy)基因和胡萝卜素脱饱和酶(crtⅠ)基因转入普通水稻,图1示所需构建的重组Ti质粒中的重组T-DNA片段。

①要粗提取含psy基因、crtⅠ基因的DNA时,利用了DNA分子的
不溶于酒精、在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
不溶于酒精、在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
物理性质。
②利用PCR扩增psy基因、crtⅠ基因时,需要通过控制
温度
温度
的方法使DNA复制在体外反复进行。常采用
琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳
来鉴定PCR产物。
③据图分析,构建重组T-DNA片段时,依次用限制酶
I-SecⅠ、KpnⅠ
I-SecⅠ、KpnⅠ
和DNA连接酶处理,将psy基因和crtⅠ基因、潮霉素抗性基因接入。
④通过农杆菌转化法,上述重组Ti质粒可以将该T-DNA片段导入水稻细胞并
整合到染色体DNA上
整合到染色体DNA上
。农杆菌纯化培养,常用
平板划线和稀释涂布平板
平板划线和稀释涂布平板
方法将单个农杆菌分散在固体培养基上。
(2)已知潮霉素对原核细胞和真核细胞的生长都有抑制作用,据此分析重组T-DNA片段中接入潮霉素抗性基因的作用是
筛选转入重组T-DNA的农杆菌和含重组T-DNA的水稻
筛选转入重组T-DNA的农杆菌和含重组T-DNA的水稻

(3)重组T-DNA片段中启动子
2
2
是水稻种子的胚乳细胞特异性表达的启动子。
(4)如图2示第一代“黄金大米”中细胞内β-胡萝卜素的合成途径。经检测发现其细胞内β-胡萝卜素含量不够高,是八氢番茄红素含量较低造成的。据此信息可采取
对psy基因进行诱变或定向改造(从其他生物中筛选),获得表达产物活性更高的psy基因,进行转基因操作
对psy基因进行诱变或定向改造(从其他生物中筛选),获得表达产物活性更高的psy基因,进行转基因操作
措施,以便获得β-胡萝卜素含量更高的第二代“黄金大米”。

【答案】不溶于酒精、在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同;温度;琼脂糖凝胶电泳;I-SecⅠ、KpnⅠ;整合到染色体DNA上;平板划线和稀释涂布平板;筛选转入重组T-DNA的农杆菌和含重组T-DNA的水稻;2;对psy基因进行诱变或定向改造(从其他生物中筛选),获得表达产物活性更高的psy基因,进行转基因操作
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/20 8:0:9组卷:6引用:2难度:0.8
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    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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