如图为利用基因工程生产乙肝疫苗的过程，质粒上箭头所指部位为相应的限制酶切割位点。质粒中lacZ基因编码产生的酶可以分解培养基中的XgaⅠ，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。回答下列问题：
（1）利用PCR技术扩增目的基因时需要的酶为 耐高温DNA 聚合酶耐高温DNA 聚合酶；此过程还需要引物，其作用是 使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，若将1个目的基因扩增n次，则需要引物 2（2n-1）2（2n-1）个。
（2）①过程为了防止目的基因与质粒任意连接，应选择 EcoR I、BamH IEcoR I、BamH I限制酶分别切割目的基因和质粒，并将切割后的质粒和目的基因用 DNA连接DNA连接酶连接形成重组质粒，该重组质粒除了含有目的基因和标记基因外，还应含有 启动子、终止子启动子、终止子（写出2点）等结构。
（3）过程②一般用 Ca2+Ca2+处理大肠杆菌。为了筛选成功导入重组质粒的大肠杆菌，可将大肠杆菌接种到含有 X-gal和青霉素X-gal和青霉素的固体培养基上，挑选颜色为 白色白色（填“蓝色”或“白色”）的菌落进一步培养。
（4）除图示方法外，还可利用乳腺生物反应器生产乙肝疫苗，该过程需要将目的基因与 乳腺中特异表达的基因乳腺中特异表达的基因启动子相连，并通过 显微注射显微注射方法将重组质粒导入到动物的受精卵中，由这个受精卵发育成的转基因动物进入泌乳期后，通过分泌乳汁即可获得乙肝抗原蛋白。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】耐高温DNA 聚合酶；使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸；2（2n-1）；EcoR I、BamH I；DNA连接；启动子、终止子；Ca2+；X-gal和青霉素；白色；乳腺中特异表达的基因；显微注射
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/25 8:0:9组卷：4引用：1难度：0.6
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
