非人灵长类动物作为脑卒中模型动物,在脑结构和生理上与人类更接近,可提供较常规啮齿类模型更多的科学价值。传统的非人灵长类脑疾病动物模型在研究中经常出现操作困难、编辑基因脱靶等问题。对非人灵长类动物的体细胞进行基因编辑,获得阳性克隆的细胞,利用体细胞核移植技术构建的动物疾病模型具有优势。请回答下列问题:
(1)基因编辑系统由sgRNA和Cas9蛋白组成,当sgRNA与靶DNA上某些序列发生局部互补结合时,Cas9蛋白就可以切割DNA。该系统和限制酶都是切割DNA的工具,二者作用的共同特点是 都能够识别DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开都能够识别DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。sgRNA的识别序列越短,基因编辑的脱靶率越高,请分析原因:sgRNA的识别序列短,特异性差,容易与其他片段结合而造成编辑出错sgRNA的识别序列短,特异性差,容易与其他片段结合而造成编辑出错。
(2)将经基因编辑的单个体细胞注入 MⅡ期MⅡ期(填时期)的去核的卵母细胞中,去核的目的是 使核移植动物模型的核遗传物质全部来自经基因编辑的单个体细胞使核移植动物模型的核遗传物质全部来自经基因编辑的单个体细胞。
(3)用电融合法使两细胞融合形成重构胚,用电刺激、蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚,使其完成 细胞分裂和发育细胞分裂和发育过程。重构胚必须移植到 同种、生理状态相同同种、生理状态相同的雌性个体中才能继续发育。
(4)为获得更多基因编辑动物模型,可在胚胎移植前对胚胎进行 胚胎分割胚胎分割。基因编辑动物模型的遗传背景保持相同,其优点是 有利于减少实验误差(或克隆动物能减少个体差异的影响)有利于减少实验误差(或克隆动物能减少个体差异的影响)。
【答案】都能够识别DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开;sgRNA的识别序列短,特异性差,容易与其他片段结合而造成编辑出错;MⅡ期;使核移植动物模型的核遗传物质全部来自经基因编辑的单个体细胞;细胞分裂和发育;同种、生理状态相同;胚胎分割;有利于减少实验误差(或克隆动物能减少个体差异的影响)
【解答】
【点评】
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发布:2024/8/9 8:0:9组卷:11引用:3难度:0.6