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非人灵长类动物作为脑卒中模型动物,在脑结构和生理上与人类更接近,可提供较常规啮齿类模型更多的科学价值。传统的非人灵长类脑疾病动物模型在研究中经常出现操作困难、编辑基因脱靶等问题。对非人灵长类动物的体细胞进行基因编辑,获得阳性克隆的细胞,利用体细胞核移植技术构建的动物疾病模型具有优势。请回答下列问题:
(1)基因编辑系统由sgRNA和Cas9蛋白组成,当sgRNA与靶DNA上某些序列发生局部互补结合时,Cas9蛋白就可以切割DNA。该系统和限制酶都是切割DNA的工具,二者作用的共同特点是
都能够识别DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开
都能够识别DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开
。sgRNA的识别序列越短,基因编辑的脱靶率越高,请分析原因:
sgRNA的识别序列短,特异性差,容易与其他片段结合而造成编辑出错
sgRNA的识别序列短,特异性差,容易与其他片段结合而造成编辑出错

(2)将经基因编辑的单个体细胞注入
MⅡ期
MⅡ期
(填时期)的去核的卵母细胞中,去核的目的是
使核移植动物模型的核遗传物质全部来自经基因编辑的单个体细胞
使核移植动物模型的核遗传物质全部来自经基因编辑的单个体细胞

(3)用电融合法使两细胞融合形成重构胚,用电刺激、蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚,使其完成
细胞分裂和发育
细胞分裂和发育
过程。重构胚必须移植到
同种、生理状态相同
同种、生理状态相同
的雌性个体中才能继续发育。
(4)为获得更多基因编辑动物模型,可在胚胎移植前对胚胎进行
胚胎分割
胚胎分割
。基因编辑动物模型的遗传背景保持相同,其优点是
有利于减少实验误差(或克隆动物能减少个体差异的影响)
有利于减少实验误差(或克隆动物能减少个体差异的影响)

【答案】都能够识别DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开;sgRNA的识别序列短,特异性差,容易与其他片段结合而造成编辑出错;MⅡ期;使核移植动物模型的核遗传物质全部来自经基因编辑的单个体细胞;细胞分裂和发育;同种、生理状态相同;胚胎分割;有利于减少实验误差(或克隆动物能减少个体差异的影响)
【解答】
【点评】
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发布:2024/8/9 8:0:9组卷:11引用:3难度:0.6
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