PHB2蛋白具有抑制细胞增殖的作用。为探究PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），大小为0.9kb（lkb=1000碱基对），利用乳腺生物反应器来表达该蛋白。回答下列问题：
（1）为获取phb2基因，提取该动物肝脏组织的总RNA，再经 逆转录逆转录过程得到cDNA，以该cDNA为模板进行PCR扩增phb2基因，PCR需要的条件是 （成对的）引物，模板、四中脱氧核苷酸（dNTP）、耐高温的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）、缓冲液（成对的）引物，模板、四中脱氧核苷酸（dNTP）、耐高温的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）、缓冲液。
（2）制备乳腺生物反应器前，首先将获得的Phb2基因与 乳腺中特异表达的基因的启动子乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元作连接；通常需要在基因两端引入产生不同黏性末端的限制酶切割位点序列再构建出表达载体，这种方案的优点是 防止目的基因和质粒自身环化；使目的基因和载体正确（定向）连接防止目的基因和质粒自身环化；使目的基因和载体正确（定向）连接；将构建好的基因表达载体通过 显微注射显微注射技术注入到受精卵中，再将受精卵培养成早期胚胎移入受体获得转基因成功的动物。
（3）近来人们尝试制备唾液腺生物反应器来代替乳腺生物反应器，与乳腺生物反应器相比其优点是 不受性别和（生长发育）时间限制不受性别和（生长发育）时间限制（至少两点），结合乳腺生物反应器的制备，简单说明唾液腺生物反应器制备过程 将phb2基因与唾液腺中特异表达的基因的启动子连接，构建出基因的表达载体导入受体细胞（受精卵），培养成早期胚胎移入受体将phb2基因与唾液腺中特异表达的基因的启动子连接，构建出基因的表达载体导入受体细胞（受精卵），培养成早期胚胎移入受体。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】逆转录；（成对的）引物，模板、四中脱氧核苷酸（dNTP）、耐高温的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）、缓冲液；乳腺中特异表达的基因的启动子；防止目的基因和质粒自身环化；使目的基因和载体正确（定向）连接；显微注射；不受性别和（生长发育）时间限制；将phb2基因与唾液腺中特异表达的基因的启动子连接，构建出基因的表达载体导入受体细胞（受精卵），培养成早期胚胎移入受体
【解答】
【点评】
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发布：2024/9/12 3:0:9组卷：1引用：2难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
