异丁醇具有燃值高、能量密度高等优点，其开发和利用对优化我国能源结构和保护环境有非常重要的意义。科研人员构建了一种表达载体pUC18（如图1）导入酵母菌，用于过量表达ILV2、ILV5、ILV3、AR010基因，以期实现大规模生产异丁醇。图2是酵母细胞中葡萄糖代谢产生异丁醇、乙醇和乙酸的示意图，其中基因ADHs和ALDs分别控制E酶和F酶的合成。回答下列问题：
（1）将基因ILV2、ILV5、ILV3和AR010依次插入到质粒上的目的基因插入位点，选用高表达启动子pTEF1和 终止子终止子作为调控序列。pTEF1是 RNA聚合酶RNA聚合酶识别并结合的位点。
（2）科研人员先将pUC18转化到大肠杆菌细胞中，以便筛选、保存和扩增重组质粒。重组质粒上的 原核原核（填“真核”或“原核”）生物复制原点使pUC18能在大肠杆菌中扩增。已知氨苄青霉素抑制细菌细胞壁的合成，pUC18中氨苄青霉素抗性基因的作用是 作为标记基因用于筛选出含有重组质粒（或目的基因）的大肠杆菌细胞作为标记基因用于筛选出含有重组质粒（或目的基因）的大肠杆菌细胞。
（3）提取完整的重组pUC18并导入组氨酸缺陷型酿酒酵母细胞中，将菌株接种在培养基中以获得单菌落，该过程称为微生物的 选择选择培养。除必要的营养物质外，该选择培养基中需要添加的物质是 CC。
A．组氨酸
B．氨苄青霉素
C．琼脂
（4）根据图示酵母细胞葡萄糖的代谢途径，为了进一步提高异丁醇的产量，应对基因 ADHs和ALDsADHs和ALDs进行改造使其表达产物减少。
【答案】终止子；RNA聚合酶；原核；作为标记基因用于筛选出含有重组质粒（或目的基因）的大肠杆菌细胞；选择；C；ADHs和ALDs
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/9 8:0:8组卷：5引用：3难度：0.5
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发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
