实验小组将启动子rd29A和拟南芥植株的抗寒基因DREBI相连后导入大豆，获得了抗寒转基因植株，图1表示构建重组质粒时所用的载体，已知Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为四种不同的限制酶，其各自识别的DNA序列如表所示。回答下列问题：
| 限制酶 | Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ |
| 识别序列及切割位点 | ↓GGATCC CCTAGG↑ |
↓TGTACA ACATGT↑ |
↓GTAC CATG↑ |
↓AAGCTT TTCGAA↑ |
Ⅱ、Ⅳ
Ⅱ、Ⅳ
两种限制酶切割质粒，原因是 同时使用两种限制酶可产生不同的黏性末端，使目的基因和质粒定向连接，酶Ⅰ破坏了标记基因，酶Ⅱ和酶Ⅲ切割出的黏性末端相同
同时使用两种限制酶可产生不同的黏性末端，使目的基因和质粒定向连接，酶Ⅰ破坏了标记基因，酶Ⅱ和酶Ⅲ切割出的黏性末端相同
。（2）欲将重组质粒导入大豆的愈伤组织细胞中，一般使用
农杆菌转化
农杆菌转化
法导入。培养基中需要加入 四环素
四环素
（填“四环素”或“氨苄青霉素”），其作用是 对含目的基因的组织细胞进行筛选
对含目的基因的组织细胞进行筛选
。（3）实验小组进一步研究了不同的温度诱导下转基因植株中抗寒基因DREBI的表达情况，实验结果如图2所示，从分子水平上检测转基因大豆中DREBI基因的表达产物，可采用的方法是
抗原-抗体杂交
抗原-抗体杂交
。试根据检测结果阐述目的植株导入DREBI基因的优点在于 随着温度的降低，DREBI基因的表达产物有利于植物抵抗寒冷胁迫，另外常温下基因不表达，避免了细胞内物质和能量的浪费
随着温度的降低，DREBI基因的表达产物有利于植物抵抗寒冷胁迫，另外常温下基因不表达，避免了细胞内物质和能量的浪费
。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】Ⅱ、Ⅳ；同时使用两种限制酶可产生不同的黏性末端，使目的基因和质粒定向连接，酶Ⅰ破坏了标记基因，酶Ⅱ和酶Ⅲ切割出的黏性末端相同；农杆菌转化；四环素；对含目的基因的组织细胞进行筛选；抗原-抗体杂交；随着温度的降低，DREBI基因的表达产物有利于植物抵抗寒冷胁迫，另外常温下基因不表达，避免了细胞内物质和能量的浪费
【解答】
【点评】
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发布：2024/8/23 6:0:3组卷：14引用：2难度：0.6
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
