马铃薯块茎含有大量的淀粉，富含多种维生素和无机盐，我国已将马铃薯作为主粮产品进行产业化开发。如图是转基因抗盐马铃薯的培育过程，请分析回答下列问题。
（1）为获取抗盐基因，可以从碱蓬细胞研磨液中提取抗盐基因的 mRNAmRNA来合成DNA。
（2）上图构建基因表达载体时，最好选用限制酶 EcoRⅠ和HindⅢEcoRⅠ和HindⅢ切割含目的基因的外源DNA和质粒，不能使用SmaⅠ切割的原因是 SamⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因SamⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因。构建好的重组质粒在抗盐基因前要加上特殊的启动子，启动子是一段有特殊结构的 DNADNA片段。
（3）将基因表达载体导入农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA上的原因是 T-DNA是可以转移的DNA（T-DNA能携带目的基因整合到受体细胞染色体的DNA上）T-DNA是可以转移的DNA（T-DNA能携带目的基因整合到受体细胞染色体的DNA上）。
通过农杆菌的转化作用，使抗盐基因插入马铃薯细胞中的染色体DNA上，从而使抗盐基因的遗传特性得以 稳定维持和表达稳定维持和表达。
（4）从个体水平上检验转基因抗盐马铃薯是否培育成功的方法是 将转基因马铃薯幼苗栽种在盐碱地或较高浓度盐溶液中，观察是否能正常生长将转基因马铃薯幼苗栽种在盐碱地或较高浓度盐溶液中，观察是否能正常生长。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】mRNA；EcoRⅠ和HindⅢ；SamⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因；DNA；T-DNA是可以转移的DNA（T-DNA能携带目的基因整合到受体细胞染色体的DNA上）；稳定维持和表达；将转基因马铃薯幼苗栽种在盐碱地或较高浓度盐溶液中，观察是否能正常生长
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/17 8:0:9组卷：32引用：6难度：0.3
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
