盐胁迫对作物的生长和产量影响较大,培育耐盐作物对盐碱地的利用、修复具有重要意义。研究人员从作物甲获得耐盐基因NtGCN2并将其转入水稻,开展耐盐水稻育种研究,其流程如图所示。图中Ti质粒箭头处表示限制酶的酶切位点,黑色区域表示完整的基因或序列;bar是除草剂抗性基因、Tetr是四环素抗性基因、Ampr是氨苄青霉素抗性基因,①~⑤表示过程。回答下列问题:

(1)终止子位于基因的下游,其作用是 终止转录终止转录。过程①需选用两种限制酶进行处理,这两种限制酶是 SmaⅠ和BclⅠSmaⅠ和BclⅠ,除选用限制酶外,过程①还要用到 DNA连接DNA连接酶;将重组质粒转入根瘤农杆菌后,可先后用添加了 四环素四环素、除草剂除草剂的选择培养基培养根瘤农杆菌,以最终筛选出重组根瘤农杆菌。
(2)过程③将水稻愈伤组织和根瘤农杆菌共培养,目的是 获得含有目的基因(耐盐基因)的水稻愈伤组织获得含有目的基因(耐盐基因)的水稻愈伤组织过程④可通过调整培养基中 生长素和细胞分裂素生长素和细胞分裂素的比例诱导愈伤组织生根、长芽,得到水稻幼苗,该过程依据的原理是植物细胞的 全能性全能性。
(3)根据标记基因的功能,筛选出成功转入NtGCN2基因水稻的方法是 在添加四环素的选择培养基上培养在添加四环素的选择培养基上培养;根据目的基因的功能,筛选出成功转入NtGCN2基因水稻的方法是 在盐碱地中培养水稻,能在盐碱地中正常生长的即为成功转入NtGCN2基因的水稻在盐碱地中培养水稻,能在盐碱地中正常生长的即为成功转入NtGCN2基因的水稻。
【考点】基因工程的操作过程综合;植物的组织培养.
【答案】终止转录;SmaⅠ和BclⅠ;DNA连接;四环素;除草剂;获得含有目的基因(耐盐基因)的水稻愈伤组织;生长素和细胞分裂素;全能性;在添加四环素的选择培养基上培养;在盐碱地中培养水稻,能在盐碱地中正常生长的即为成功转入NtGCN2基因的水稻
【解答】
【点评】
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发布:2024/7/18 8:0:9组卷:3引用:2难度:0.6
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