菊天牛是菊花的主要害虫之一．科研人员将抗虫基因转入菊花，培育出抗虫菊花．如图是获得转基因菊花的技术流程，请据图回答：
（注：卡那霉素抗性基因（kanR）作为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感．）
（1）为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可用Ca2+（或CaCl2）Ca2+（或CaCl2）处理土壤农杆菌，使其处于感受态．
（2）将重组质粒导入土壤农杆菌的目的是利用农杆菌能够感染菊花（或“植物”）细胞，并将T-DNA转移至受体细胞感染菊花（或“植物”）细胞，并将T-DNA转移至受体细胞的特点，使目的基因进入受体细胞中，并插入到菊花细胞的染色体DNA染色体DNA上，最终形成转基因植株．
（3）将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素和卡那霉素卡那霉素的培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选转基因菊花．
（4）用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时，需根据抗虫基因（目的基因）抗虫基因（目的基因）的核苷酸序列设计特异引物，以转基因菊花的DNA（或“含目的基因的菊花DNA”）转基因菊花的DNA（或“含目的基因的菊花DNA”）为模板进行第一轮扩增．
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】Ca2+（或CaCl2）；感染菊花（或“植物”）细胞，并将T-DNA转移至受体细胞；染色体DNA；卡那霉素；抗虫基因（目的基因）；转基因菊花的DNA（或“含目的基因的菊花DNA”）
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/27 14:0:0组卷：10引用：4难度：0.5
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
