大刍草是玉米的原始祖先，具有较强的抗病抗逆等特性，可为玉米育种提供原始的遗传材料。研究发现，大刍草基因组中有一个D基因仅在体细胞（2n）和精子中正常表达，在卵细胞中不转录。为研究D基因表达对卵细胞的影响，某小组设计了以下实验。据图回答下列问题：
（1）大刍草D基因与Luc基因融合前需要利用 同一种限制酶同一种限制酶切割。融合后的少量D-Luc基因可以利用 PCR技术PCR技术获取大量的D-Luc融合基因。
（2）要构建大刍草的DNA文库，应从大刍草 体细胞体细胞（填“卵细胞”“精子”“体细胞”或“体细胞或精子”）中提取总RNA，原因是 大刍草体细胞中有大刍草全部的DNA且D基因在体细胞中正常表达，而精子中一半的核DNA，卵细胞中D基因不能正常表达（不转录）大刍草体细胞中有大刍草全部的DNA且D基因在体细胞中正常表达，而精子中一半的核DNA，卵细胞中D基因不能正常表达（不转录）。
（3）在过程①前，一般需要用 Ca2+Ca2+处理农杆菌细胞，使其具备 吸收周围环境中DNA分子吸收周围环境中DNA分子的生理状态。过程②转化筛选。
（4）从转入D-Luc融合基因植株未成熟种子中分离出胚，观察到细胞内仅含一个染色体组，判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的，而一般情况下，大刍草卵细胞在未受精时不进行发育，由此表明 D-Luc融合基因能在卵细胞中表达且使卵细胞不经受精而直接发育成胚D-Luc融合基因能在卵细胞中表达且使卵细胞不经受精而直接发育成胚。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】同一种限制酶；PCR技术；体细胞；大刍草体细胞中有大刍草全部的DNA且D基因在体细胞中正常表达，而精子中一半的核DNA，卵细胞中D基因不能正常表达（不转录）；Ca2+；吸收周围环境中DNA分子；D-Luc融合基因能在卵细胞中表达且使卵细胞不经受精而直接发育成胚
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：3引用：4难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
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2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
