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供体细胞的分化状态和表观遗传修饰模式是影响体细胞核移植胚胎发育的重要因素。为研究供体细胞RNAm6A修饰(即RNA某位点的甲基化)水平对猪核移植胚胎发育的影响,研究者进行系列实验。
(1)核移植的受体是
去核的卵母
去核的卵母
细胞,核移植后的重构胚发育至
桑葚胚或囊胚
桑葚胚或囊胚
阶段可利用
胚胎移植
胚胎移植
技术转移到代孕母体子宫内以获得子代个体,从早期胚胎中分离获得的具有自我更新和分化潜能的
胚胎干细胞
胚胎干细胞
可用于医学研究。
(2)RNAm6A修饰可通过提高mRNA结构稳定性来影响早期胚胎发育。猪骨髓间充质干细胞(甲组)属于多能干细胞,猪胎儿成纤维细胞(乙组)则是处于分化终端的体细胞。研究者比较了两细胞内RNAm6A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率,结果如图1、2。
结果表明,核供体细胞的分化程度越高,
RNA修饰水平和核移植重构胚的发育效率
RNA修饰水平和核移植重构胚的发育效率
越低。
(3)研究发现甲组细胞内甲基转移酶M(催化RNAm6A修饰)的表达水平高于乙组,为验证RNAm6A修饰与核移植胚胎发育能力的关系,研究者进行如下实验:
组别 对核供体细胞的处理方法 核移植胚胎发育能力的检测结果
胚胎总数 胚胎卵裂率 囊胚率
对照组 导入空载体 187 59.4% 16.8%
实验组 导入M基因表达载体 185 71.3% 27%
导入空载体是为了排除
载体
载体
等对实验结果的干扰。结果表明,
提高供体细胞核的RNAm6A修饰水平
提高供体细胞核的RNAm6A修饰水平
可提高核移植胚胎的发育能力。
(4)为研究导致不同供体细胞RNAm6A修饰水平差异的原因,研究者分析了M基因启动子的甲基化水平,发现骨髓间充质干细胞中M基因启动子的甲基化水平为22%,而猪胎儿成纤维细胞则为50%。
据此设计实验:实验组用DNA甲基化抑制剂处理骨髓间充质干细胞,对照组不处理;检测两组的M基因启动子甲基化水平。
请修正实验方案:
应还选择猪胎儿成纤维细胞作为实验材料;还应检测RNA修饰水平
应还选择猪胎儿成纤维细胞作为实验材料;还应检测RNA修饰水平

【答案】去核的卵母;桑葚胚或囊胚;胚胎移植;胚胎干细胞;RNA修饰水平和核移植重构胚的发育效率;载体;提高供体细胞核的RNAm6A修饰水平;应还选择猪胎儿成纤维细胞作为实验材料;还应检测RNA修饰水平
【解答】
【点评】
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发布:2024/8/9 8:0:9组卷:13引用:3难度:0.6
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