利用乳腺生物反应器可生产人白细胞介素2（hIL-2）和与其具有协同作用的融合蛋白（由两个单独基因编码的结构域组成的蛋白质）药物，但融合蛋白常难以发挥各组分的正常功能。研究发现，口蹄疫病毒2A肽（FMDV 2A）是一种“自切割”多肽，能将自身切成4个片段，可用于构建多基因表达载体。如图是构建FMDV 2A介导的hIL-2基因和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因乳腺特异性表达载体，并验证其在乳腺上皮细胞中表达的主要过程，以期为提高乳腺生物反应器生产药物的效能奠定基础。请回答下列问题。
（1）过程①应选用的引物是 引物2和引物3引物2和引物3，该过程除加入引物外，还需加入 耐高温的TaqDNA聚合酶、原料等耐高温的TaqDNA聚合酶、原料等。
（2）下面4种引物可用于过程①的是 P1和P2P1和P2。
P1：5'-CCCTCGAGATGTACAGGATCCTGTACAT-3'
P2：5'-CCATCGATTCAAGTTAGTGTTGAGATGA-3'
P3：5'-CCCTCGAGATGTACAGGATGCAACTCCT-3'
P4：5'-CCGAGCTCAGTGTTGAGATGAATCGATC-3'
（3）过程③中，使用人工膜制成的脂质体将质粒3导入受体细胞，其主要原理是 生物膜具有一定的流动性生物膜具有一定的流动性。
（4）将转染后的山羊乳腺上皮细胞置于含 新霉素新霉素的培养液中培养、筛选；将筛选出的细胞置于含催乳素的培养液中培养，利用荧光显微镜观察 是否有绿色荧光是否有绿色荧光，进一步筛选出转染成功的细胞，培养液中加入催乳素的作用是 诱导乳腺蛋白基因表达诱导乳腺蛋白基因表达。
（5）过程④中，乳腺上皮细胞中检测到游离的hIL-2，原因是 目的基因未成功导入受体细胞的染色体DNA上目的基因未成功导入受体细胞的染色体DNA上。与生产融合蛋白药物相比，此项研究有望提高乳腺生物反应器生产药物的效能，主要表现是 实现了两个基因的合并表达，能够使两者同时起作用实现了两个基因的合并表达，能够使两者同时起作用。
（6）研究人员试图以转染成功的奶牛乳腺上皮细胞作为供体，培养转基因克隆胚胎，主要涉及的现代生物技术有 ）动物细胞培养技术、转基因技术）动物细胞培养技术、转基因技术。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】引物2和引物3；耐高温的TaqDNA聚合酶、原料等；P1和P2；生物膜具有一定的流动性；新霉素；是否有绿色荧光；诱导乳腺蛋白基因表达；目的基因未成功导入受体细胞的染色体DNA上；实现了两个基因的合并表达，能够使两者同时起作用；）动物细胞培养技术、转基因技术
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/4 8:0:5组卷：9引用：1难度：0.4
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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