稻田生物固氮作用是稻田氮素循环的关键环节，某些蓝细菌是自生固氮菌（独立生活时能够利用空气中游离的氮分子作为氮源，并将氮分子转化为氨，氨转化为铵盐后是植物良好的氮素营养）。蓝细菌中B基因表达的B蛋白是一种有助于蓝细菌高效吸收NO-3的载体蛋白，科学家利用基因工程和细胞工程等技术，尝试将蓝细菌的B基因导入水稻细胞，以期获得吸收NO-3能力较强的转基因水稻，从而增加粮食产量。如图1、2分别是农杆菌的Ti质粒和蓝细菌B基因的结构模式图。回答下列有关问题：
（1）为获得可用于进一步研究的固氮蓝细菌的菌株，从培养基功能的角度分析，可以使用 选择选择培养基从自然菌群中筛选，该培养基所需的营养物质有无机碳源、水、无机盐水、无机盐（写两种），但不需要添加 氮源氮源营养物质，并在有光条件下培养。
（2）利用PCR技术以图2中的DNA片段为模板扩增B基因时，需要的引物有 引物甲和引物丙引物甲和引物丙（填写图中引物代号），理由是 引物甲和引物丙能分别与B基因两条链的一段脱氧核苷酸序列碱基互补配对，能扩增两引物之间的B基因片段引物甲和引物丙能分别与B基因两条链的一段脱氧核苷酸序列碱基互补配对，能扩增两引物之间的B基因片段。
（3）在构建含B基因的表达载体时，需要用限制酶 BclI和HindIIIBclI和HindIII切割Ti质粒和B基因，不选用其他限制酶的原因是 BamHI会破坏四环素抗性基因（和氨苄青霉素抗性基因），Sau3AI不能切割Ti质粒BamHI会破坏四环素抗性基因（和氨苄青霉素抗性基因），Sau3AI不能切割Ti质粒。
（4）为检测B基因在转基因水稻细胞中是否成功表达，可采用抗原—抗体杂交法在分子水平上检测，还可以在个体水平上检测，请写出个体水平检测的实验思路：将等量的生长状态相同的普通水稻和转基因水稻分别置于含相同浓度NO-3的完全培养液中，在适宜条件下培养一段时间，检测并比较两组培养液中NO-3的剩余量（或测定两组水稻根系吸收NO-3的速率）将等量的生长状态相同的普通水稻和转基因水稻分别置于含相同浓度NO-3的完全培养液中，在适宜条件下培养一段时间，检测并比较两组培养液中NO-3的剩余量（或测定两组水稻根系吸收NO-3的速率）。
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【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】选择；水、无机盐；氮源；引物甲和引物丙；引物甲和引物丙能分别与B基因两条链的一段脱氧核苷酸序列碱基互补配对，能扩增两引物之间的B基因片段；BclI和HindIII；BamHI会破坏四环素抗性基因（和氨苄青霉素抗性基因），Sau3AI不能切割Ti质粒；将等量的生长状态相同的普通水稻和转基因水稻分别置于含相同浓度的完全培养液中，在适宜条件下培养一段时间，检测并比较两组培养液中的剩余量（或测定两组水稻根系吸收的速率）
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【解答】
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发布：2024/5/22 8:0:8组卷：29引用：1难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
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