马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ除作为植物储藏蛋白外，还可以作为植物抵抗昆虫侵害的重要手段。科研人员克隆了马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ基因的cDNA（PINⅠ），构建了基因表达载体（如图），并将其转化到水稻中，使水稻自身产生抗虫蛋白而达到抗虫目的。请回答问题。
（1）马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ在 核糖体核糖体（填细胞结构）中合成后运输到液泡中储存，以免被细胞中的 蛋白酶蛋白酶降解；昆虫取食植物，马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ与昆虫消化道内的蛋白酶形成酶—抑制剂复合物，最终导致昆虫因缺乏代谢中必需的 氨基酸氨基酸而死亡。
（2）过程①表示 逆转录逆转录。
（3）为了便于扩增的PINⅡ基因与载体1连接，需要在引物F和引物R的 5'5'端分别添加AAGCTT序列和 TCTAGATCTAGA序列；PINⅡ扩增完成最后一次循环后，仍需在72℃下继续延伸5min,其主要目的是 使子链充分延伸使子链充分延伸。
（4）下列物质中，属于过程③正常进行所必需的有 a、b、ea、b、e（填字母）。
a.限制酶XhoⅠb.限制酶HindⅢc.限制酶XbaⅠd.缓冲液 e.T4DNA连接酶 f.Taq DNA聚合酶
（5）过程⑦筛选时，首先将愈伤组织取出，用无菌水清洗两遍，以除去附着于愈伤组织表面的 农杆菌农杆菌菌液，然后转移到含 潮霉素潮霉素的选择培养基中进行暗培养，挑选抗性愈伤组织诱导再分化。
（6）马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ具有诱导表达的特性。转化的PINⅡ基因仅在植物受到伤害（如虫害）后表达，其生物学意义在于既能减少 能量和物质能量和物质的浪费，又能延缓害虫对马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ产生 抗性抗性。
【答案】核糖体；蛋白酶；氨基酸；逆转录；5'；TCTAGA；使子链充分延伸；a、b、e；农杆菌；潮霉素；能量和物质；抗性
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/28 8:0:9组卷：7引用：4难度：0.5
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
