如图表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，如图表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ四种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。
（1）限制性核酸内切酶切断的化学键所处的具体部位是 一条链上相邻两个核苷酸的磷酸基团与脱氧核糖之间一条链上相邻两个核苷酸的磷酸基团与脱氧核糖之间。
（2）若用限制酶SmaⅠ完全切割左图所示DNA片段，其产物长度为537bp、661bp和 790790bp。
（3）若左图中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出下图及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有 44种不同长度的DNA片段。
（4）若将右图中质粒和目的基因D通过同一种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是 BamHⅠBamHⅠ，理由是 MspⅠ和SmaⅠ会破坏目的基因，MboⅠ会将质粒上的两个标记基因全破坏，BamHⅠ在目的基因两端和质粒抗生素A抗性基因上有识别序列，既能形成重组质粒，又因破坏2个标记基因中的一个利于筛选MspⅠ和SmaⅠ会破坏目的基因，MboⅠ会将质粒上的两个标记基因全破坏，BamHⅠ在目的基因两端和质粒抗生素A抗性基因上有识别序列，既能形成重组质粒，又因破坏2个标记基因中的一个利于筛选。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】一条链上相邻两个核苷酸的磷酸基团与脱氧核糖之间；790；4；BamHⅠ；MspⅠ和SmaⅠ会破坏目的基因，MboⅠ会将质粒上的两个标记基因全破坏，BamHⅠ在目的基因两端和质粒抗生素A抗性基因上有识别序列，既能形成重组质粒，又因破坏2个标记基因中的一个利于筛选
【解答】
【点评】
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发布：2024/9/13 0:0:8组卷：4引用：1难度：0.5
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