人们对富含纤维素的木材废料、废纸、农作物残渣等进行焚烧，不仅浪费资源而且污染环境。研究人员从土壤中分离获得能降解纤维素的细菌（A菌），从A菌中提取一种纤维素酶基因导入大肠杆菌，构建并筛选纤维素降解能力更强的工程菌（B菌）。B菌可通过发酵工程工业化生产纤维素酶。回答下列问题：
（1）为了筛选A菌，可在富含枯枝落叶的土壤中取样，并选用以

纤维素

纤维素

为唯一碳源的培养基进行分离、纯化，再接种到筛选鉴定培养基上，培养观察、测量并记录菌落和降解圈直径，结果如表所示：

菌株名称	降解圈直径（cm）	菌落直径（cm）
D1	2.6	1.75
D3	2.7	1.90
Lb1	1.4	0.45
H1	0.7	0.37

由表可知，菌株

Lb1

Lb1

为目标菌株，降解纤维素能力最强。
（2）为构建高效降解纤维素菌种，进行以下实验操作：
①从目标菌株中获取目的基因并经过PCR扩增，若扩增n次，需要的引物数量至少是

2ⁿ⁺¹-2

2ⁿ⁺¹-2

。
②为成功构建含目的基因的重组质粒，结合如图需要从表格中选择限制酶

NcoⅠ

NcoⅠ

和

NheⅠ

NheⅠ

切割质粒。成功构建基因表达载体后，转化大肠杆菌，在抗性培养基中培养。

限制酶	识别序列及切割位点
NcoⅠ	5′-C↓CATGG-3′
SphⅠ	5′-GCTAG↓C-3′
NheⅠ	5′-G↓GATCC-3′
BamHⅠ	5′-G↓CTAGC-3′

（3）构建并筛选高效降解纤维素的工程菌后，可通过发酵工程工业化生产纤维素酶。其中

发酵罐内发酵

发酵罐内发酵

是发酵工程的中心环节，请结合微生物培养的相关知识推测，在发酵过程中需控制

溶解氧、温度、pH等

溶解氧、温度、pH等

（至少答出两点）等发酵条件。
（4）试举一实例预期该高效降解纤维素的工程菌在处理废弃物和环境保护方面的应用：

降解秸秆，减少秸秆燃烧带来的空气污染

降解秸秆，减少秸秆燃烧带来的空气污染

。