科学家将抗虫基因导入棉花细胞培育转基因抗虫棉，如图是培育过程示意图（质粒上所标BamHⅠ、HindⅢ、PritⅡ、EcoRⅠ、Kpnl为五种限制酶及其酶切位点）。回答下列问题。
（1）选用双酶切割图中质粒时应选择的限制酶为 PitⅠ和EcoRⅠPitⅠ和EcoRⅠ。为了获得大量的抗虫基因，采用 PCRPCR技术扩增目的基因，其中引物的作用是 使DNA聚合酶能够从引物3′端连接脱氧核苷酸使DNA聚合酶能够从引物3′端连接脱氧核苷酸。
（2）双酶切后的质粒和目的基因连接比一种限制酶切好的原因是 可以防止目的基因和质粒的自身环化，也可以防止目的基因和质粒的反向连接可以防止目的基因和质粒的自身环化，也可以防止目的基因和质粒的反向连接。
（3）图示将基因表达载体导入棉花细胞的方法为 农杆菌转化农杆菌转化法，该方法利用的原理是该菌侵染植物细胞后，能将T质粒上的T-DNA转移到侵染的细胞，并 将其整合到植物细胞染色体的DNA上将其整合到植物细胞染色体的DNA上。
（4）从分子水平上检测抗虫基因是否在植物细胞内表达的方法为 抗原—抗体杂交法抗原—抗体杂交法；从个体水平鉴定转基因棉花植株培育是否成功的方法为 做抗虫接种实验，观察害虫是否死亡做抗虫接种实验，观察害虫是否死亡。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】PitⅠ和EcoRⅠ；PCR；使DNA聚合酶能够从引物3′端连接脱氧核苷酸；可以防止目的基因和质粒的自身环化，也可以防止目的基因和质粒的反向连接；农杆菌转化；将其整合到植物细胞染色体的DNA上；抗原—抗体杂交法；做抗虫接种实验，观察害虫是否死亡
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/19 8:0:9组卷：3引用：2难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
