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常见的探针有核酸探针和蛋白质探针。两种探针结构和功能均不相同,故而应用在不同的检测中。而两种探针的制备过程中所应用的技术也不相同。请回答下列问题。
Ⅰ、蛋白质探针的制备。
(1)蛋白质探针常用
单克隆抗体
单克隆抗体
技术来制备。该技术的基本流程是将
特定的抗原
特定的抗原
注射给实验动物,获取的脾细胞与骨髓瘤细胞融合后,用HAT培养基筛选培养对象。该筛选过程得到的杂交瘤细胞是产生
抗体
抗体
的杂交瘤细胞,接下来要经过
抗体
抗体
检测来获得产生特定蛋白的杂交瘤细胞。最终将纯化得到的特定蛋白结合上荧光或放射性标记,即为蛋白质探针。
(2)上述HAT培养基是
液体
液体
(填“液体”或“固体”)培养基。融合成杂交瘤细胞后再检测寻找产生特定目标蛋白的杂交瘤细胞,而不直接在脾细胞中寻找产生特定蛋白的B淋巴细胞的原因是
B淋巴细胞不能分裂,不具备克隆化的能力,培养产生的抗体浓度低,不足以检测
B淋巴细胞不能分裂,不具备克隆化的能力,培养产生的抗体浓度低,不足以检测

Ⅱ、不对称PCR是利用不等量的一对引物来产生大量单链DNA(ssDNA)的方法。该方法制备的ssDNA结合上荧光或放射性标记,即为核酸探针。

(3)不对称PCR中加入的一对引物中含量较少的被称为限制性引物,含量较多的被称为非限制性引物。两者的比例通常为1:100。PCR反应的最初的若干次循环中,其扩增产物主要是双链DNA(dsDNA),但当限制性引物消耗完后,就会产生大量的ssDNA。据下图可知,最后大量获得的ssDNA是图中的
(填“甲”或“乙”)链。
(4)若反应最初有a个模板DNA分子,最初的6次循环扩增产生dsDNA,后10个循环均只扩增ssDNA,则需要限制性引物
2
7
-
2
a
2
2
7
-
2
a
2
个。请绘制这16个循环中ssDNA的分子数量随循环次数的变化图2。(说明:纵轴的刻度请自行标注。)

【答案】单克隆抗体;特定的抗原;抗体;抗体;液体;B淋巴细胞不能分裂,不具备克隆化的能力,培养产生的抗体浓度低,不足以检测;甲;
2
7
-
2
a
2
【解答】
【点评】
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发布:2024/9/12 1:0:10组卷:2引用:1难度:0.5
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    发布:2024/12/31 1:30:1组卷:7引用:3难度:0.6
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    (1)与植物体细胞杂交相比,图2中过程②特有的诱导融合的方法是 
     
    ,过程②选用的骨髓瘤细胞 
     
    (选填“能”或“不能”)在HAT培养基上生长。
    (2)对③筛选出的杂交瘤细胞,还需进行
     
     
    ,才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比,单克隆抗体最主要的优点是
     
    (答出一点)。
    (3)图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是
     
    。图2方框内需要经过
     
    次筛选,才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为
     
    、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻,需进行传代培养。
    (4)与直接使用长春碱相比,将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药,对人体的副作用更小,原因是
     

    发布:2024/12/31 1:30:1组卷:21引用:4难度:0.5
  • 3.使用高效的细胞毒素药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞但细胞毒素没有特异性,在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害。这限制了它在临床上的应用。抗体一药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合,实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤ADC通常由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成,它的作用机制如图所示。下列叙述正确的是(  )

    发布:2024/12/31 3:30:1组卷:18引用:2难度:0.7
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