IKK激酶山IKKα、IKKβ和IKKγ三种亚基组成，该酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某重症联合免疫缺陷（SCID）患儿的IKKβ基因编码区第1183位碱基T突变为C。为研究该患儿发病机制，研究人员应用大引物PCR定点诱变技术获得突变基因，并培育出SCID模型小鼠。图1为定点诱变获得突变基因的过程。
（1）在定点诱变获取突变基因时，PCR1中使用的引物有 引物A、引物C引物A、引物C，PCR中使用的引物有 引物B、大引物b引物B、大引物b。PCR1和PCR2不能在同一个反应体系中进行，原因是 引物之间能结合，会干扰引物和模板链的结合，影响PCR过程引物之间能结合，会干扰引物和模板链的结合，影响PCR过程。
（2）PCR在第一个循环之前通常将DNA样品加热至95℃数分钟进行预变性处理，其目的是 增加大分子模板DNA彻底变性的概率增加大分子模板DNA彻底变性的概率。由于大引物较长，含C与G的碱基较多，为减少非目标基因的获得，在PCR2复性过程中应采取的措施是 适当提高退火温度适当提高退火温度。
（3）培育模型鼠的过程中，需用限制酶SacI、HindⅢ对突变基因和载体进行双酶切，双酶切的优点是 防止质粒和目的基因的自身环化及反向连接防止质粒和目的基因的自身环化及反向连接。研究人员经鉴定、筛选获得一只转基因杂合鼠HE，让HE与野生鼠杂交得F1，F1雌雄鼠随机交配得F2。对F2中纯合野生鼠WT、纯合突变鼠HO、杂合鼠HE三种小鼠胸腺淋巴细胞中组成IKK激酶的三种亚基进行提纯和电泳，结果如图2。据此结果推测SCID患者免疫缺陷产生的机制是 IKKβ基因突变导致IKKβ含量减少，IKK激酶活力降低，不利于免疫细胞的分化IKKβ基因突变导致IKKβ含量减少，IKK激酶活力降低，不利于免疫细胞的分化。
【答案】引物A、引物C；引物B、大引物b；引物之间能结合，会干扰引物和模板链的结合，影响PCR过程；增加大分子模板DNA彻底变性的概率；适当提高退火温度；防止质粒和目的基因的自身环化及反向连接；IKKβ基因突变导致IKKβ含量减少，IKK激酶活力降低，不利于免疫细胞的分化
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/5/13 8:0:8组卷：36引用：3难度：0.5
相似题
-
1．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
2．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：4引用：3难度：0.7
