回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。
野生型大肠杆菌(E.coli)具有完整的LacZ基因,该基因编码的β-半乳糖苷酶由α片段和ω片段两部分组成,两部分均存在时可将无色化合物X-gal“切割”成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝,从而使整个菌落变为蓝色。DH5α是基因工程中常用的一种大肠杆菌诱变菌株,对氨苄青霉素敏感,其LacZ基因中编码ω片段的序列仍然保留,但编码α片段的序列缺失。
(1)LacZ基因控制β-半乳糖苷酶合成的过程主要包括 转录转录和 翻译翻译两个环节。
(2)某研究小组构建了质粒pXY-1,如图甲所示,该质粒含氨苄青霉素抗性基因Ampr和编码大肠杆菌β-半乳糖苷酶α片段的基因片段LacZ。图乙显示的则是NasⅠ、HpaⅡ和KasⅠ三种限制酶的识别序列(↓表示切割位点)。若以该质粒作为运载体,将外源目的基因(图丙)导入大肠杆菌DH5α菌株,在构建重组质粒时应选用的限制酶是 KasKasⅠKasKasⅠ。此外,还需用到的另一种酶是 DNA连接酶DNA连接酶。

(3)(不定项)若用含有氨苄青霉素和X-gal的固体培养基筛选导入了pXY-1质粒的DH5α大肠杆菌,下列说法正确的是 BCBC。
A.没有导入任何质粒的DH5α大肠杆菌可以在该培养基上生长且菌落为白色
B.导入了pXY-1空载体质粒的DH5α大肠杆菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色
C.导入了pXY-1重组质粒的DH5α大肠杆菌可以在该培养基上生长且菌落为白色
D.导入了pXY-1重组质粒的DH5α大肠杆菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色
(4)现从(3)中的固体培养基平板上挑取一个重组菌落,经扩大培养后提取质粒,分别用不同的限制酶处理并对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳,结果如表所示:
所用限制性内切酶 | 所得条带长度 |
BamHⅠ、ScaⅠ双酶切 | 1230bp、2770bp |
HpaⅡ、ScaⅠ双酶切 | 460bp、1240bp、xbp |
900
900
bp,在其内部存在 HpaHpaⅡ
HpaHpaⅡ
(填限制酶名称)的切割位点,表中字母x代表的数值应为 2300
2300
。【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】转录;翻译;KasKasⅠ;DNA连接酶;BC;900;HpaHpaⅡ;2300
【解答】
【点评】
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