土壤中存在大量微生物，硝化细菌就是其中的一类，硝化细菌包括亚硝酸菌和硝酸菌，它们可将氨或铵盐氧化为易被植物吸收的硝酸盐，而硝化细菌本身也在这个过程获取能量用于合成有机物。
（1）生物小组的同学取得土样后加无菌水制成菌液，将菌液涂布在牛肉膏蛋白胨培养基上，并放入恒温箱中培养，结果从平板上发现了硝化细菌、酵母菌和大肠杆菌的菌落。于是他们利用选择培养基开始对菌液中的微生物进行筛选。
①在筛选硝化细菌时，培养基中的成分必须包括

（NH₄）₂SO₄、无机盐、琼脂、H₂O

（NH₄）₂SO₄、无机盐、琼脂、H₂O

（以下材料可供选择：H₂O、乳糖、尿素、牛肉膏、（NH₄）₂SO₄、KNO₃、无机盐、琼脂、青霉素、伊红—美蓝染料）；如利用上述培养基筛选大肠杆菌菌落，则应另外添加的成分是

乳糖、伊红-美蓝染料

乳糖、伊红-美蓝染料

，菌落特征为

颜色为黑色

颜色为黑色

；由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的

子细胞群体

子细胞群体

就是菌落。
②筛选微生物可用涂布平板的方法接种，在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是

培养基表面的菌液太多会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果

培养基表面的菌液太多会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果

。要长期保存筛选出来的菌种，采用的方法是

甘油管藏法

甘油管藏法

。
（2）小组的同学又对分离出的大肠杆菌进行了以下四项实验：
实验1：将大肠杆菌接种于一般培养基上，结果出现菌落；
实验2：用一定剂量的紫外线处理大肠杆菌，产生突变种1，将突变种1接种于一般培养基后，不出现菌落；但在培养基内添加营养物质A后，就出现菌落；
实验3：用另一剂量的紫外线处理大肠杆菌，得突变种2，将突变种2接种于一般培养基后，也不出现菌落；但在培养基内添加营养物质B后，就出现菌落；
实验4：将突变种1和突变种2一起接种于一般培养基上，数日后出现菌落。
实验4中出现菌落的原因最可能是

突变体1能够合成营养物质B，突变体2能够合成营养物质A，因此一起培养可以互相提供必需的营养物质

突变体1能够合成营养物质B，突变体2能够合成营养物质A，因此一起培养可以互相提供必需的营养物质

。