如图所示PIJ702是一种常用质粒，其中tsr为硫链丝菌素（一种抗生素）抗性基因；mel为黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分别只有一处识别序列。
回答下列问题：
（1）限制酶可以识别双链DNA中特定核苷酸序列，并使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键磷酸二酯键断裂。
（2）用限制酶SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因，与质粒pIJ702上长度为0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段进行置换，构建重组质粒pZHZ8，上述两种质粒经限制酶Bgl1/酶切后所得片段长度见表1。由此判断目的基因的片段长度为 1.41.4kb,且目的基因中含有 11个BglⅡ切割位点。
表1
| PLJ702 | pZHZ8 | |
| BglⅡ | 5.7kb | 6.7kb |
转化
转化
过程。（4）不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素的固体培养基上生长状况如表2所示。若要筛选导入pZHZ8的链霉菌细胞，所需硫链丝菌素浓度至少应在
5
5
μg/mL以上，且菌落的颜色为 白色
白色
。若要检测整合到染色体DNA上的目的基因是否发挥功能作用，首先需检测受体细胞的 RNA
RNA
（填“DNA”或“RNA”），检测方法采用 分子杂交
分子杂交
技术。表2
| 固体培养基中硫链丝菌素浓度（μg/mL） | 0 | 1 | 2 | 5 | 10 |
| 不含质粒的链霉菌生长状况 | ++++ | +++ | + | - | - |
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】磷酸二酯键；1.4；1；转化；5；白色；RNA；分子杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/15 8:0:8组卷：8引用：2难度：0.6
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（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
