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人类乳头瘤病毒(HPV)有多种亚型,HPV45属于高危型,与宫颈癌的发生密切相关。L1蛋白是组成HPV病毒衣壳的主要结构蛋白,科研人员进行了HPV45的抗L1蛋白单克隆抗体的制备与研究。回答下列问题:
(1)提取HPV45的L1蛋白,注射到小鼠体内,其目的是
诱导小鼠产生能够分泌抗L1蛋白抗体的B淋巴细胞
诱导小鼠产生能够分泌抗L1蛋白抗体的B淋巴细胞
。一段时间后,取小鼠脾脏组织,剪碎用
胰蛋白/胶原蛋白酶
胰蛋白/胶原蛋白酶
酶处理,使其分散成单个细胞制成细胞悬液,与小鼠骨髓瘤细胞诱导融合,筛选出杂交瘤细胞。
(2)将得到的杂交瘤细胞接种到多孔培养板进行
克隆化
克隆化
培养,分别取其上清液进行
抗体阳性/抗体
抗体阳性/抗体
检测,检测的原理及操作流程如图1。经多次筛选后,取A、B、C、D四种杂交瘤细胞上清液进行检测,结果如图2。

①据图分析,实验过程中需将
L1蛋白
L1蛋白
作为抗原固定在固相载体上,分别取
不同稀释倍数(浓度)的4种杂交瘤细胞上清液和未免疫小鼠血清
不同稀释倍数(浓度)的4种杂交瘤细胞上清液和未免疫小鼠血清
加入反应体系,经洗涤后加入酶标抗体形成复合物,再次洗涤,加入相应底物,复合物携带的酶可与相应底物反应显色,测吸光值,颜色越深吸光值越高。
②图2结果表明
四种杂交瘤细胞上清液均含有能与L1蛋白结合的抗体,且上清液A中抗体与L1蛋白结合能力最强
四种杂交瘤细胞上清液均含有能与L1蛋白结合的抗体,且上清液A中抗体与L1蛋白结合能力最强

③依据图2结果,研究人员推测A、B、C、D四种上清液中,A上清液的抗体与L1蛋白结合的位点是HPV45型病毒识别并侵染人体细胞的关键位点。为探究此推测,进行实验,
实验步骤如下:
步骤一:将小鼠宫颈细胞悬液均分为四组,编号甲、乙、丙、丁;
步骤二:从稀释倍数为1:320的A、B、C、D(杂交瘤细胞)上清液中分离提纯抗体,
分别与HPV45型病毒混合,再加入到小鼠宫颈细胞悬液甲、乙、丙、丁中
分别与HPV45型病毒混合,再加入到小鼠宫颈细胞悬液甲、乙、丙、丁中

步骤三:在相同且适宜的条件下培养一段时间,检测培养液中被侵染的宫颈细胞比例。实验预期结果与结论:若
甲组中被侵染的宫颈细胞比例最高/甲组中被侵染的宫颈细胞比例高于其他组
甲组中被侵染的宫颈细胞比例最高/甲组中被侵染的宫颈细胞比例高于其他组
,则推测正确。
(3)科研人员制备HPV45的抗L1蛋白单克隆抗体,在医学方面的应用有
用于HPV45病毒感染的诊断、治疗、运载药物(或诊断试剂、治疗疾病、运载药物)
用于HPV45病毒感染的诊断、治疗、运载药物(或诊断试剂、治疗疾病、运载药物)

【答案】诱导小鼠产生能够分泌抗L1蛋白抗体的B淋巴细胞;胰蛋白/胶原蛋白酶;克隆化;抗体阳性/抗体;L1蛋白;不同稀释倍数(浓度)的4种杂交瘤细胞上清液和未免疫小鼠血清;四种杂交瘤细胞上清液均含有能与L1蛋白结合的抗体,且上清液A中抗体与L1蛋白结合能力最强;分别与HPV45型病毒混合,再加入到小鼠宫颈细胞悬液甲、乙、丙、丁中;甲组中被侵染的宫颈细胞比例最高/甲组中被侵染的宫颈细胞比例高于其他组;用于HPV45病毒感染的诊断、治疗、运载药物(或诊断试剂、治疗疾病、运载药物)
【解答】
【点评】
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发布:2024/7/5 8:0:9组卷:2引用:2难度:0.6
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    发布:2024/12/31 1:30:1组卷:7引用:3难度:0.6
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    (1)与植物体细胞杂交相比,图2中过程②特有的诱导融合的方法是 
     
    ,过程②选用的骨髓瘤细胞 
     
    (选填“能”或“不能”)在HAT培养基上生长。
    (2)对③筛选出的杂交瘤细胞,还需进行
     
     
    ,才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比,单克隆抗体最主要的优点是
     
    (答出一点)。
    (3)图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是
     
    。图2方框内需要经过
     
    次筛选,才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为
     
    、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻,需进行传代培养。
    (4)与直接使用长春碱相比,将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药,对人体的副作用更小,原因是
     

    发布:2024/12/31 1:30:1组卷:21引用:4难度:0.5
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