器官移植已成为治疗脏器功能衰竭的有效手段，但移植排斥是影响移植物和患者存活的主要问题。同种异体排斥反应的细胞学机制主要为T细胞介导的免疫反应。其中白细胞介素-2（IL-2）参与移植排斥反应。白细胞介素-2（IL-2）是主要由活化的CD++细胞产生的免疫调节因子，对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用。科学工作者将含IL-2基因的DNA片段和质粒pPIC9K构建成重组质粒，并导入酵母菌GS15（组氨酸缺陷菌株，不能合成组氨酸）中，筛选到了能分泌IL-2的工程菌株。请回答：
（1）构建重组质粒需要用到的酶有 限制酶和DNA连接酶限制酶和DNA连接酶，质粒上的启动子的作用是 作为RNA聚合酶识别并结合的位点，驱动基因转录作为RNA聚合酶识别并结合的位点，驱动基因转录。根据上图分析，为了构建重组质粒应该选用 EcoRⅠ酶和NotⅠ酶EcoRⅠ酶和NotⅠ酶（填酶）分别切割含有IL-2基因的DNA片段和质粒。
（2）用不含组氨酸的培养基进行筛选，有导入了质粒pPIC9K和导入了重组质粒的两种酵母菌细胞。这两种类型的细胞能否被筛选出来，若能，则说明筛选的原理；若不能，则说明筛选的措施。 不能，用含有四环素和组氨酸的培养基进行筛选不能，用含有四环素和组氨酸的培养基进行筛选。
（3）制备能分泌IL-2的工程菌株宜用酵母菌作为受体细胞，而不适合用大肠杆菌。从细胞结构与功能的角度分析，原因是 酵母菌是真核细胞，其含有的内质网和高尔基体能对蛋白质进行加工修饰酵母菌是真核细胞，其含有的内质网和高尔基体能对蛋白质进行加工修饰。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】限制酶和DNA连接酶；作为RNA聚合酶识别并结合的位点，驱动基因转录；EcoRⅠ酶和NotⅠ酶；不能，用含有四环素和组氨酸的培养基进行筛选；酵母菌是真核细胞，其含有的内质网和高尔基体能对蛋白质进行加工修饰
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/7 8:0:9组卷：5引用：2难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
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